把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后,把濾膜(編號面朝上)放在一張保鮮膜上,并在保鮮膜上作幾個不對稱的標記,以使濾膜與性自顯影片位置對應。
用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時。
底片顯影后,在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標記陽性雜交信號的位置,同時在不對稱分布點的位置上作出標記。可從底片上取下透明紙,通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。
原位雜交是一項非常重要的生物技術,可以用于研究基因表達和調控,檢測基因變異和染色體異常,監(jiān)測細胞生長和凋亡,以及識別特定的細胞類型或組織。然而,它需要特殊的操作技術和設備,以及嚴格的對照實驗才能獲得可靠的結果。
原位雜交技術還在以下生物領域有應用:
生態(tài)學和環(huán)境科學:在生態(tài)學和環(huán)境科學領域,原位雜交技術可以用于研究生物與環(huán)境之間的相互作用。例如,通過標記特定基因的探針,可以檢測環(huán)境中微生物種群的分布和變化,進而研究其對環(huán)境的影響和作用。
進化生物學:在進化生物學領域,原位雜交技術可以用于研究物種之間的遺傳差異和進化關系。例如,通過比較不同物種之間基因序列的差異,可以揭示物種之間的親緣關系和進化歷程。